《海賊無雙3》在前作基礎上新增了多名可使用角色，雖然遊戲中人物圖鑑有64個位置，但實際可用角色的角色為37名，其他為援助角色，援助角色不可選擇只在特定戰場出現。 下面是全部37名可用角色的解鎖方法以及援助角色的登場戰場。
可用角色一覽
| 角色名 | 解鎖條件 |
| 路飛 | ・初始可用 |
| 索隆 | ・故事模式：完成序章 |
| 娜美 | ・故事模式：完成第2章2話 |
| 烏索普 | ・故事模式：完成第1章2話 |
| 山治 | ・故事模式：完成第1章3話 |
| 喬巴 | ・故事模式：完成第2章話 |
| 羅賓 | ・故事模式：完成第2章話 |
| 弗蘭奇 | ・故事模式：完成第3章3話 |
| 布魯克 | ・故事模式：完成第3章4話 |
| ■革命軍 | |
| 薩博 | ・故事模式：完成最終章4章 ・首發特典解鎖 |
| 伊万科夫 | ・初始可用 |
| ■海軍・CP9・世界政府 | |
| 藤虎 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 斯摩格 | ・故事模式：完成第1章5話 |
| 達斯琪 | ・初始可用 |
| 青雉 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 路奇 | ・故事模式：完成第3章2話 |
| 黃猿 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 赤犬 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 卡普 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 麥哲倫 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 凱撒 | ・故事模式：完成最終章3章 |
| ■超新星 | |
| 羅 | ・初始可用 |
| ■王下七武海 | |
| 多弗拉明戈 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 米霍克 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 巴基 | ・故事模式：完成第1章1話 |
| 克洛克達爾 | ・故事模式：完成第4章2話 |
| 莫利亞 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 漢考克 | ・故事模式：完成第4章4話 |
| 甚平 | ・故事模式：完成第4章2話 |
| 熊 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| ■神 | |
| 艾尼路 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| ■白鬍子海賊團 | |
| 艾斯 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 馬爾科 | ・故事模式：完成第4章3話 |
| 白鬍子 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| ■四皇 | |
| 蒂奇 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| 香克斯 | ・夢之航海日誌模式解鎖 |
| ■其他 | |
| 佩羅娜 | ・故事模式：完成終章1話 |
援助角色一覽
| 同伴名 | 登場戰場 |
| 摩根 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 亞爾麗塔 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 克洛 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 科比 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 首領克里克 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 惡龍 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 小八 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 拉班 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 瓦波魯 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| Mr.1 | 故事模式4章2話夢之航海日記模式隨機出現 |
| Mr.2 | 故事模式4章2話夢之航海日記模式隨機出現 |
| Mr.3 | 4章2話夢之航海日記模式隨機出現 |
| 卡庫 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 加布拉 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 布魯諾 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 戰桃丸 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 和平主義者 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 米諾陶洛斯 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 漢尼拔 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 喬茲 | 故事模式4章3話 |
| 比斯塔 | 故事模式4章3話 |
| 貝拉米 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 韋帕 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 霍迪 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 維爾戈 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 莫奈 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
| 巴傑斯 | 夢之航海日記模式隨機出現 |
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